一、Load Sample:1. 启动桌面“Zen”图标软件,2. 在硬件初始化后,点击软件左侧“Eject Tray”, 此时CD7机身上方会将底座弹出;3. 将多孔板/圆皿按正确方向放入底座后,点击“Load Sample”,样品会被传入至载物台位置,此时在屏幕中间会有一张孔板预览图;4. 软件会自动检测多孔板/圆皿的类型、皿底的材质、和皿底的厚度;(也可以手动填写皿底的材质及厚度)5. 检测结束后,屏幕中央会有一张导航图,软件根据测量的裙边厚度计算出每颗物镜可以拍摄的最大范围(不同颜色显示)。6. 转至Acquisition,进行图像采集。
二、Acquisition:1.在smart setup中勾选荧光染料,或者保存常用的荧光染料,用时再进行勾选,其中oblique为PGC成像模式,2.预览找到焦平面,分别调节不同通道的拍照参数,3、高级实验勾选高级功能。
三、Tile Region Setup:live的前提下,在Tile Region Setup界面下找到contour,在视野的当前位置附近手动画出拼图区域。
四、Position Setup:live的前提下,Position Setup界面下找到Location 手动随机添加点。
五、Time Series:勾选高级设置Time Series,设置拍摄的cycles/h/day等单位以及拍摄的时间间隔,此时间间隔包含拍摄一张所需时间。
六、Z-stack:对于细胞样品的拍摄,建议设置center模式;多点的中心按照center设定,拍摄z轴范围是固定的;若要根据细胞的不同位置及厚度设定,则需要
Experiment Designer模块。
七、Focus Strategy:注意:在随机添加的多点,建议检查每个点所在的位置(x, y, z坐标)将不在拍摄范围的点移动或去掉,并将焦距调好,此时,右键选择Set current X/Y/Z for select position,记录当前位置,使用Definite Focus进行多点补偿找焦。
八、Start Experiment:在Start Experiment后,会弹出新窗口,此时点击红框中Automatically Determine Offsets for all Points, DF会根据设置的不同Z位置记住多
点offset,当所有位置前出现绿色对勾时,点击Continue Experiment。实验正式开始。
九、实验数据保存与输出,实验结果可导出成视频模式和单张图片模式。