分选注意事项

分选注意事项

分选前

1. 先用无菌水清洗分选仓，洗去残留的PBS，再用酒精棉无菌消毒，尤其是waste drawer和电极板。

2. 选择合适的喷嘴，易碎的细胞尽量选用低压和大喷嘴。进行96孔板分选时，尽量采用大喷嘴。分选前确保喷嘴没有堵塞。

3. 确保液流稳定，如果不稳定，请用无菌水冲洗，待液流稳定后再分选。

4. 酒精或clean清洗后，用无菌水大量冲洗，洗去残留的的酒精或clean，保证分选细胞活性。

分选时

1. 上样前用内加适量抗生素的1×PBS进行管路冲洗，用40或70um无菌滤膜进行过滤。

2. 选择合适的进样速度，保证效率>75%，70um喷嘴流速一般不超过20000cell/s，100um喷嘴一般不超过6000cell/s（按具体情况决定）。

3. 分选时收集管里保证一定的培养液，调节时保证液滴打在液面上，防止细胞打在管壁上影响活性。15ml收集管液面高于3ml，5ml收集管液面高于1ml。

4. 收集管中培养液抗生素浓度是正常培养液的2-3倍（按具体情况决定）。

5. 如果分选过程中喷嘴堵塞，请进行超声清洗，安装完后重新调节Drop delay。

分选后

1. 分选完后请整理好无菌操作台，做好登记。

2. 分选下来的细胞请尽快换液无菌培养。

3. 如果有任何染菌或其它的情况，请及时联系我们。

*独立分选时请严格按照分选操作步骤进行，如有问题请及时联系工作人员

*无菌分选室里不超过3人（包括工作人员）

*严禁分选室里带入食物及聊天

*如果分选带有感染性病原的细胞，请及时与工作人员联系，做好防护措施

*学生分选之间保持至少半小时以上的无菌清洗时间